ECV-304人脐静脉内皮细胞

规格：70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶

特点：细胞代数为2-3代

包装：内层无菌自封袋；专用防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；说明书

细胞来源：ATCC、sciencell、DSMZ、ECACC、国内

货期：1-2周

运输方式：快递运输

 ECV-304人脐静脉内皮细胞

售后服务：

复旦大学提供原代/传代细胞，质量保证，生长状态良好，没有细菌 真菌 支原体等微生物污染。细胞一般以T25培养瓶包装，容积75ml细胞数量可达10的6次方左右。购买方收到细胞应当马上检查，如发现细胞状态不佳或者大部分死亡情况下，须当天联系我司。得到我技术确认后免费补发一株。一周内发现细胞有污染情况，请拍照记录并与销售部联系。

售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时传真或E-mail致销售人员，我们将尽快为您解决。

备注：刚收到细胞时，胎牛血清可以用15%培养两三天，利于细胞尽快恢复状态，细胞状态稳定后，再调回10%即可。

细胞污染和补救方法：

一、菌污染

状态：若细胞出现细菌污染，肉眼观察培养基会发现培养基颜色变黄，浑浊，显微镜下观察培养基，发现培养基中有黑色细沙状的物体，有规律的移动，对细胞的生长影响明显，严重时会导致细胞裂解死亡。

<菌污染>

预防和补救：

1.保证细胞操作是处于完全无菌的状态；

2.将培养箱彻底消毒灭菌，如使用84消毒液及75%酒精擦拭培养箱，另外需定期对培养箱进行消毒处理；

3.将感染细菌的细胞及时丢弃，防止污染其他细胞。

二、霉菌及真菌污染

       状态：肉眼观察培养基发现培养基颜色基本无变化，不浑浊，但是培养基中由絮状漂浮物，显微镜下观察，若感染真菌可看到分叉细丝状的结构（不同种类结构不同），若感染霉菌显微镜下可看到片状的结构，不透明，真菌及霉菌对影响细胞的生长影响不大。

<真菌污染>

预防和补救：

     1.保证细胞房的干净整洁，干燥的环境(潮湿的环境利于霉菌及真菌的生长)。

     2.控制外来人员进出实验室。

     3.对实验室及培养箱进行彻底消毒。

     4.若细胞非常珍贵，且不易获得，可以对污染的细胞采取如下操作。

     悬浮细胞：收集SCL-1 Cell并离心，用PBS漂洗，重复此操作数次。

     贴壁细胞：用PBS轻轻冲洗细胞，丢弃，重复此操作数次。

三、支原体感染

      状态：在普通光学显微镜下无法观察到支原体，需使用光学显微镜或者电镜进行观察，细胞感染支原体后，生长极其缓慢，形态不佳，培养基无明显变化。

预防和补救：

       预防：实验室新购买的血清及培养基需检测是否含有支原体，引进的新品种细胞需做支原体检测，向培养基中添加预防支原体的抗生素。

       补救：向培养基中添加抗生素，（如氧氟沙星10 μg/ml、环丙沙星10 μg/ml、卡那霉素20~50 μg/ml、四环素10~50 μg/ml、庆大霉素200μg/ml等抗生素），或者向培养基中添加支原体清除剂清除支原体数天。

四、黑蛟虫

       状态：在普通光学显微镜下可观察到培养基中有许多黑点，但当细胞密度大时，黑点会减少，培养基无明显变化，一般不会影响细胞的生长。黑胶虫来源于血清中。

<黑蛟虫污染>

       预防和补救：一般黑胶虫不会影响细胞的生长状态，可以尝试改变培养基的品牌。血清冻融采取逐级冻融的方法。

五、原虫感染

      状态：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可用生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生，但会与SCL-1 Cell争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞占优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，zui终形成恶性循环。

<原虫污染>

       影响细胞污染的因素很多，在我看来污染源主要是是细胞操作及细胞培养箱环境。这需要我们：

      1、提高细胞操作技巧，禁止交叉使用枪头，在酒精灯火焰5公分距离内操作。

      2、定期对细胞培养箱消毒，培养箱水盘中的水也要定期更换，并使用无菌水。

      3、进入细胞房之前及在无菌操作台操作SCL-1 Cell实验之前需使用紫外灯照射30分钟。

      4、每次开培养箱之前需用酒精消毒双手。

      5、定期对培养箱进行消毒。

      6、配制的培养基需验证无菌后方可进行细胞培养。